用外泌體處理細(xì)胞為什么不加血清
1、干細(xì)胞外泌體作為細(xì)胞分泌物,具有極低的免疫原性和高血液和細(xì)胞相容性,因此在使用時(shí)可能具有更高的安全性。由于干細(xì)胞外泌體來(lái)源于干細(xì)胞,并經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的制備和處理過(guò)程,因此它們可能不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng)。
2、來(lái)源不同:細(xì)胞上清外泌體是由細(xì)胞主動(dòng)分泌產(chǎn)生的一種小型細(xì)胞外囊泡,主要存在于細(xì)胞表面或分泌到胞外環(huán)境,是細(xì)胞與周圍環(huán)境信息交流的一種重要方式。而血清是指血液中不含血細(xì)胞的部分,由肝臟和腎臟等器官分泌產(chǎn)生,通過(guò)血液循環(huán)系統(tǒng)傳輸?shù)饺砀髌鞴佟?/p>
3、cpe外泌體的提取技術(shù)采用了無(wú)血清培養(yǎng)基技術(shù),這一技術(shù)能夠排除血清中本身存在的外泌體,因?yàn)閏pe外泌體是從動(dòng)物臍帶精華中提取出來(lái)的,而血清中的外泌體完全無(wú)動(dòng)物源性,所以能夠保證提取出來(lái)的成分純凈度,另外不僅能提高細(xì)胞釋放外泌體的數(shù)量,還可以保證外泌體中營(yíng)養(yǎng)因子的huo性哦。
4、外泌體提取的常用起始材料量因樣本類型而異:細(xì)胞培養(yǎng)上清:建議單次提取的樣品量不低于 20mL。若采用超速離心法,第一次摸索條件時(shí),起始培液量最好 50mL 以上。如果是一些外泌體釋放量低的細(xì)胞系,可能需要上百毫升。血清或血漿:?jiǎn)未翁崛×拷ㄗh不低于 200μL。
5、在樣本處理和外泌體提取過(guò)程中,會(huì)遇到一些常見(jiàn)問(wèn)題,如血漿電鏡圖片背景雜亂、CD63條帶呈彌散狀、樣品粘度過(guò)大、血清來(lái)源的外泌體污染、細(xì)胞凋亡過(guò)程中的雜質(zhì)污染等。對(duì)于這些問(wèn)題,需要采取相應(yīng)的處理方法,如血清超速離心去除外泌體、選擇無(wú)血清培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)等。外泌體提取后,需要合理保存。

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