AAV在眼部注射方法有哪些
1、肺部注射包括鼻內滴注法和氣管插管術。鼻內滴注法操作簡單,直接將病毒懸液滴入鼻腔,但顆粒可能沉積在上呼吸道,需要較大劑量的病毒。氣管插管術能將病毒載體直接輸入肺部,避免上呼吸道損失,但需特殊設備和技巧。此外,還有氣管內注射,操作與鼻內滴注法類似,但直接注入氣管。
2、然而,基于AAV載體的基因治療通常采用視網膜下腔注射,要求高技能操作,增加視網膜脫離風險,并受限于橫向擴散能力,只能感染注射中心附近一小部分視網膜細胞。玻璃體腔注射避免了這些問題,是一種常用的安全、簡便的遞送方式。但缺乏高效且特異性轉導視網膜細胞的AAV載體。
3、但具體操作與結果解讀存在差異。通過一款LVV眼用注射液對比兩種方法,結果顯示,光阻法檢測出的微粒數量遠高于顯微計數法。光阻法在檢測過程中容易引入假陽性結果,主要由于樣品制備過程中可能產生的氣泡與少量硅油干擾,導致測試結果不符合規(guī)定。
4、視網膜下腔注射適用于RPE細胞和光感受器細胞的轉導,主要步驟包括麻醉、切口制作、插入注射針、開始注射、緩慢出針,以及避免切口處感染等。此方法可避免觸發(fā)體液免疫反應,對另一只眼再次視網膜下注射無影響。在選擇注射方式時,應考慮疾病的性質,同時選擇對小鼠最便利的方式。
5、然而,基于AAV載體的眼病基因治療通常需要視網膜下腔注射,這需要經驗豐富的專家進行,增加視網膜脫離的風險。AAV橫向擴散能力有限,只能感染注射中心附近的一部分視網膜細胞。玻璃體腔注射能避免這些問題,是一種常用、安全、操作簡單的遞送方式。
