AAV在眼部注射方法有哪些
1、肺部注射包括鼻內(nèi)滴注法和氣管插管術。鼻內(nèi)滴注法操作簡單，直接將病毒懸液滴入鼻腔，但顆?？赡艹练e在上呼吸道，需要較大劑量的病毒。氣管插管術能將病毒載體直接輸入肺部，避免上呼吸道損失，但需特殊設備和技巧。此外，還有氣管內(nèi)注射，操作與鼻內(nèi)滴注法類似，但直接注入氣管。
2、然而，基于AAV載體的眼病基因治療通常需要視網(wǎng)膜下腔注射，這需要經(jīng)驗豐富的專家進行，增加視網(wǎng)膜脫離的風險。AAV橫向擴散能力有限，只能感染注射中心附近的一部分視網(wǎng)膜細胞。玻璃體腔注射能避免這些問題，是一種常用、安全、操作簡單的遞送方式。
3、) 麻醉小鼠，確保其對疼痛刺激無反應。2) 保護小鼠眼睛，保持濕潤并抑制眨眼反射。3) 保持小鼠體溫，防止麻醉后過低。4) 清潔小鼠耳朵，并消毒。5) 打開鼓室大皰，暴露鐙骨動脈和圓窗膜。6) 輕輕在圓窗膜中心穿刺，觀察液體流出。7) 將0.6~2μL的AAV載體注射至耳蝸鼓階。
4、首先，所有的操作都應在符合相應生物安全等級的實驗室環(huán)境中進行，確保最大程度的防護。在處理過程中，務必避免直接接觸病毒載體，包括通過傷口注射、誤食、吸入或接觸黏膜。萬一發(fā)生皮膚接觸或濺入眼睛的情況，應立即用大量清水沖洗，以沖洗掉可能沾染的病毒。
5、實現(xiàn)特異性表達的方法包括選擇組織特異性血清型、使用細胞特異性啟動子以及局部注射等。通過優(yōu)化AAV血清型、啟動子選擇與注射策略，可實現(xiàn)目標組織或細胞的精準基因傳遞與表達，為基因治療與科研提供強大工具。針對特異性表達的策略不斷優(yōu)化，AAV的應用領域與潛力持續(xù)擴展。
