AAV在眼部注射方法有哪些
最后,AAV的注射方式包括腦立體定位、腦室注射等,這些方法能夠實現(xiàn)基因在特定神經(jīng)區(qū)域的精確表達。以腦立體定位為例,如圖9所示,通過AAV9結合CamKIIα特異性啟動子在小鼠海馬區(qū)進行注射,可以實現(xiàn)基因在興奮性神經(jīng)元的特異性表達。
AAVRec2血清型通過系統(tǒng)注射途徑能夠高效、特異地轉導脂肪組織,且其靶向性可通過給藥方式(如口服或腹腔注射)進行調整,以適應不同脂肪組織類型。啟動子的選擇決定了基因表達的特異性和空間性。
注射方式包括定點或多點注射,減少脫靶效應和病毒用量。對于內臟脂肪等難感染部位,腹腔注射AAVRec2成為有效策略。以具體案例為例,通過調控Slpi表達影響Mecp2Adi KO小鼠的棕色脂肪功能,這顯示出rAAV在脂肪組織研究中的實際應用。
在神經(jīng)系統(tǒng)中,特異性相對更強的啟動子選擇尤為重要,常見的神經(jīng)組織特異性啟動子包括巨細胞病毒啟動子CMV、CMV增強子融合的雞-肌動蛋白啟動子CAG等。此外,AAV載體上轉錄后調控元件的添加,如內含子和WPRE元件,對于提高外源基因表達具有重要意義。
對于需要直接靶向的策略,腸系膜動脈注射不可忽視,盡管它涉及到手術操作。具體步驟包括異氟醚麻醉、脾臟區(qū)域穿刺、SMA暴露并固定,然后使用微血管放大器處理并注射定制針頭。注射后,記得妥善移除器械,恢復血液流動。在選擇注射方法和劑量時,我們建議您在預實驗階段進行個性化調整。
